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在微生物实验室中,为了迅速响应实验需求,我们常常需要预先准备琼脂培养基。这些培养基在灭菌后必须得到恰当的保存,以保持其品质和效果。
首先,融化琼脂培养基是一个关键步骤。我们大家可以通过将其放入沸水浴或高压锅的层流蒸汽中来实现。对于已经高压处理过的培养基,我们应尽量减少重新加热的时间,并避免过度加热,以免影响培养基的品质。融化后的培养基应短暂放置在室温中,以防止玻璃瓶因温差过大而破碎。之后,培养基应放入47℃至50℃的恒温水浴锅中冷却保温,直至使用。这个温度范围可以根据实际培养基的凝固温度适当调整。融化后的培养基应尽快使用,一般放置时间不应超过4小时,未用完的培养基不宜留待下次使用。
接下来,制备平板时,我们需要将融化的培养基倾注到平皿中,形成至少3mm厚的琼脂层。平皿盖好后,放置于水平面上,使琼脂冷却凝固。如果需要储存平板,或者培养时间超过48小时,或培养温度高于40℃,则需要倾注更多的培养基。市场上大部分培养基的灌装量为20mL,但实际上,每个平皿灌装25mL到30mL的培养基平板更为理想,以F防培养过程中水分的流失导致培养基质量下降。
至于平板的储存,凝固后的培养基应立即使用或存放于5℃±3℃的冰箱中,使用密封袋保存,避免阳光直晒以防止培养基成分的改变。在平板底部或侧边做好标记,包括名称、制备日期和有效期,也可以使用适宜的培养基编码系统进行标记。将倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存,可以延长储存期限。为了避免冷凝水的产生,平板应冷却后再装入袋中。储存前不要对培养基表面进行干燥处理。
对于那些用来以表面接种形式培养微生物的固体培养基,我们需要先对琼脂表面进行干燥。这能够最终靠揭开平皿盖,将平板倒扣于烘箱或培养箱中(温度设为25℃~50℃)或放在有对流的无菌超净工作台中,直到培养基表面的水分消失为止。注意别过度干燥,以免影响培养基的质量。
可惜的是,自行预制的琼脂培养基需要精心保存才能延长有限的有效期,但市面上也有一些即用型培养基,如3分钟培养基,它们在常温下可以存储长达12个月,这些培养基在需要接种时,只需微波炉加热3分钟即可倒平板。这种即用型培养基不仅简化了准备工作,还确保了实验的效率和准确性,成为微生物实验室的理想选择。返回搜狐,查看更加多